ФРАГМЕНТАЦИЯ ДНК СПЕРМАТОЗОИДОВ АРТ-ЭКО – клиника лечения бесплодия в Москве

Методы коррекции фрагментации ДНК сперматозоидов в сочетании с варикоцеле у мужчин с бесплодием в браке

*Импакт фактор за 2018 г. по данным РИНЦ

Журнал входит в Перечень рецензируемых научных изданий ВАК.

Читайте в новом номере

В настоящее время нарушениям отцовского генома уделяется все большее внимание в репродуктивной медицине. Особенно актуальна оценка дополнительных параметров эякулята, в частности фрагментации ДНК сперматозоидов.
Цель исследования: определить диагностическую ценность дополнительных спермальных тестов у мужчин с нарушениями фертильности при варикоцеле, их взаимосвязь с показателями спермограммы, а также определить влияние оперативного метода лечения на уровень фрагментации ДНК сперматозоидов.
Материал и методы: в исследование включено 60 человек с бесплодием в браке и левосторонним варикоцеле II степени. После проведенного обследования все пациенты подвергались варикоцелэктомии по методике Мармар. Пациенты 1-й группы в послеоперационном периоде спермопротективную терапию не получали. Пациентам 2-й группы с 1-го дня после операции назначен препарат Андродоз по 2 драже 2 р./сут в течение 6 мес. Оценка спермограммы и дополнительных спермальных тестов проводилась до операции и через 6 мес. после операции.
Результаты и обсуждение: в ходе исследования отмечен, наряду с нарушением основных показателей спермограммы (по рекомендациям ВОЗ, 2010), повышенный уровень фрагментации ДНК. Оперативное лечение по поводу варикоцеле может приводить к улучшению состояния ДНК сперматозоидов, что позволяет увеличить шанс зачатия либо улучшить прогноз при проведении вспомогательных репродуктивных технологий. Оперативное лечение в комбинации с препаратом Андродоз оказало наиболее положительное влияния на основные показатели спермограммы и уровень фрагментации ДНК сперматозоидов.
Заключение: наша работа показала целесообразность использования дополнительных спермальных тестов, в частности определения уровня фрагментации ДНК, при обследовании мужчин с нарушениями фертильности. Оценивать уровень фрагментации ДНК сперматозоидов у больных с варикоцеле необходимо даже при нормозооспермии (по рекомендации ВОЗ, 2010), что позволит более полно оценивать способность к зачатию у данной категории пациентов.

Ключевые слова: варикоцеле, бесплодие, спермограмма, фрагментация ДНК сперматозоидов, Андродоз, репродуктивная медицина, спермальные тесты, эякулят, спермопротективная терапия, варикоцелэктомия.

Для цитирования: Неймарк А.И., Неймарк Б.А., Давыдов А.В. и др. Методы коррекции фрагментации ДНК сперматозоидов в сочетании с варикоцеле у мужчин с бесплодием в браке. РМЖ. 2017;25(8):506-510.

Methods of correcting the fragmentation of sperm DNA in combination with varicocele in men with infertility in marriage
Neimark A.I. 1 , Neimark B.A. 1 , Davydov A.V. 1 ,. Nozdrache N.Av1, Borisenko D.V. 1 , Arkhipov D.O. 1 , Borisova O.G. 2 , Semenova N.A. 2

1 Altai State Medical University, Barnaul
2 «Mother and Child» Clinic, Barnaul

At present, violations of the paternal genome are receiving increasing attention in reproductive medicine. It is especially important to evaluate the additional parameters of the ejaculate, in particular, fragmentation of the sperm DNA.
The aim of the study was to determine the diagnostic value of additional sperm tests in men with fertility disorders in varicocele, their relationship to spermogram parameters, and to determine the effect of surgical treatment on the level of fragmentation of sperm DNA.
Patients and methods: The study included 60 people with infertility in marriage and left-sided varicocele of the second degree. After the examination, all patients underwent varicocelectomy using the Marmar technique. Patients of group 1, in the postoperative period did not receive spermoprotective therapy. Patients of group 2, were prescribed the drug Androdoz — 2 drops 2 times a day for 6 months beginning from 1 day after the operation. Evaluation of the spermogram and additional seminal tests were performed before the operation and 6 months after the operation.
Results and discussion: In our study we noted a violation of the main spermogram values (according to WHO 2010), along with an increased level of DNA fragmentation. Surgical treatment of varicocele can improve the state of sperm DNA, which increases the chance of conception, or improves prognosis in conducting the assisted reproductive technologies. Surgical treatment in combination with Androdoz had the most positive effect on the results of the main indicators of the spermogram and the level of fragmentation of the sperm DNA.
Conclusion: Our study showed the reasonability of using additional sperm tests, in particular the determination of the level of DNA fragmentation, when examining men with impaired fertility. It is necessary to assess the level of fragmentation of sperm DNA in patients with varicocele even with normozoospermia (according to WHO 2010), which will allow a fuller evaluation of the ability to conceive in this category of patients.

Читайте также:  Почему болит копчик и что с этим делать - Лайфхакер

Key words: varicocele, infertility, spermogram, fragmentation of sperm DNA, Androdoz, reproductive medicine, seminal tests, ejaculate, spermoprotective therapy, varicocelectomy.
For citation: Neimark A.I., Neimark B.A., Davydov A.V. et al. Methods of correcting the fragmentation of sperm DNA in combination with varicocele in men with infertility in marriage // RMJ. 2017. № 8. P. 506–510.

В статье приведены методы коррекции фрагментации ДНК сперматозоидов в сочетании с варикоцеле у мужчин с бесплодием

Материал и методы

Только для зарегистрированных пользователей

Фрагментация ДНК сперматозоидов

Что такое фрагментация ДНК

Фрагментация ДНК сперматозоидов — повреждение генетических цепочек в сперматозоидах, которое напрямую влияет на мужскую фертильность. Чем больше разрывов и повреждений в цепочке ДНК в сперматозоидах мужчины, тем меньше вероятность беременности у женщины, в том числе при помощи вспомогательных методов искусственного оплодотворения. Если зачатие все-таки состоялось, то поврежденные цепочки ДНК могут привести к неправильному развитию плода, также увеличивается риск выкидыша.

Когда проводят анализ

Анализ спермограммы на фрагментацию ДНК в сперматозоидах может быть назначено врачом при следующих показаниях:

  • бесплодие;
  • неудачные попытки ЭКО;
  • невынашивание беременности;
  • неправильное развитие эмбрионов;
  • возраст мужчины старше 35 лет;
  • хронические заболевания органов половой системы мужчины.

2 350 руб. бесплатно

  • Методы диагностики женского бесплодия
  • Оценка овариального резерва
  • Методы диагностики мужского бесплодия
  • Анализ спермограммы с расшифровкой
  • Спермограмма с МАР-тестом
  • Фрагментация ДНК сперматозоидов
  • HBА тест
  • Посткоитальный тест (проба Шуварского)

Экспертное мнение врача

Для выполнения исследования мужчине необходимо сдать на анализ эякулят. При этом важно заранее подготовиться: в течение недели воздерживаться от секса, правильно питаться, не употреблять алкоголь, не курить, не принимать горячую ванну и отказаться от посещения сауны.

Полученный материал отправляется в лабораторию, где в сперму добавляют специальные реагенты, благодаря которым под мощным микроскопом можно увидеть сперматозоиды с фрагментацией ДНК. Нормой считается менее 15 % таких сперматозоидов. В случае если количество патологических клеток превышает указанное количество, врач-андролог назначит соответствующее лечение.

Капто Александр Александрович Врач уролог-андролог высшей категории, к.м.н., Доцент кафедры клинической андрологии ФПКМРМИ РУДН, профессор РАЕ., Руководитель Центра Андрологии «СМ-Клиника»

Преимущества проведения в «СМ-Клиника»

Передовые протоколы ВМИ, ЭКО, ИКСИ В нашем Центре ЭКО используются только прошедшие многочисленные клинические испытания, безопасные и вместе с тем высокоэффективные технологии.
Опытные репродуктологи Собственная эмбриологическая лаборатория позволяет осуществлять все этапы лечения в стенах нашего центра.
Минимализация риска гиперстимуляции «СМ-Клиника» располагает всеми возможностями, в том числе собственной диагностической базой и эмбриологической лабораторией, необходимой для реализации полного цикла ЭКО.
Комплексная поддержка Современные методы позволяют нашим врачам установить точную причину нарушения репродуктивной функции и предложить эффективное лечение.

Получить консультацию

Мы круглосуточно готовы ответить на ваши вопросы!

Срок выполнения и результаты исследования

Обычно срок выполнения исследования составляет от одной до двух недель. В Центре репродуктивного здоровья «СМ-Клиника» результат анализа можно узнать уже через 2 дня.

В результате анализа пациент получает информацию о проценте сперматозоидов, содержащих фрагментированную ДНК. Для выявления причин фрагментации ДНК необходима консультация квалифицированного врача уролога-андролога. К нарушению целостности ДНК сперматозоидов могут привести как внутренние, так и внешние факторы: варикоцеле или недозревание сперматозоидов, а также воздействие химио- или рентгенотерапии, вредные привычки мужчины. В зависимости от факторов, влияющих на фрагментацию ДНК, врачи назначают соответствующую терапию.

Читайте также:  Пантокрин «Пантея»® (Pantocrine «Panteja») - инструкция по применению, состав, аналоги препарата, до

Наши преимущества

В Центре репродуктивного здоровья «СМ-Клиника» работают высококвалифицированные специалисты, выполняющие анализ. Вы в самые кратчайшие сроки получите результаты анализов, а профессиональные врачи-андрологи назначат грамотное и эффективное лечение.

Остались вопросы?

Нужна дополнительная информация? Не нашли ответ на свой вопрос? Оставьте заявку и наши специалисты проконсультируют Вас.

Врачи

В Центре репродуктивного здоровья «СМ-Клиника» прием ведут более 50 врачей самых востребованных специальностей.

Гончиков
Батор
Санданович

Калинина
Светлана
Александровна

Капто
Александр
Александрович

Врач уролог-андролог высшей категории,
к.м.н.,
Доцент кафедры клинической андрологии ФПКМРМИ РУДН, профессор РАЕ.,
Руководитель Центра Андрологии «СМ-Клиника»

Куллыев
Андрей
Поллыевич

Эмбриолог,
кандидат биологических наук

Курбатов
Дмитрий
Геннадьевич

Врач уролог-андролог высшей категории,
д.м.н., профессор

Мартиросян
Лусинэ
Норавандовна

Моисеенко
Алексей
Эдуардович

Врач уролог-андролог, врач-хирург,
Заместитель главного врача по КЭР в Центре репродуктивного здоровья «СМ-Клиника»

Привалов
Дмитрий
Владимирович

Ржавскова
Вера
Борисовна

Трошина
Мария
Николаевна

Эмбриолог,
заведующая эмбриологическим отделением

Что такое фрагментация ДНК в сперматозоидах, какой анализ ее выявляет и как вылечиться

Фрагментация ДНК сперматозоидов – дефект содержащегося в ядре мужской половой клетки генетического материала. Это серьезная и сложно корректируемая патология. При большом количестве таких сперматозоидов мужская сперма теряет фертильность (способность к оплодотворению). Даже современные методы искусственного оплодотворения (ЭКО и ИКСИ) зачастую оказываются бессильны. Выявить фрагментацию ДНК можно при помощи специальных микробиологических исследований эякулята.

Общие сведения

Молекула ДНК, по сути, является генетической инструкцией. В ней закодирован путь развития и функционирования любого живого организма. В сперматозоиде ДНК упакованы в виде особого вещества – хроматина, которое находится в ядре (в средней части головки).

ДНК состоит из двух спирально свитых друг с другом нитей (полинуклеотидов), состоящих из звеньев (нуклеотидов). Фрагментация – это ломка нитей, выпадение отдельных звеньев, вследствие чего нарушается генокод. Подобные микроповреждения не всегда влияют на способность сперматозоида проникать в яйцеклетку, но за таким оплодотворением последует самопроизвольный аборт или патологии развития плода.

Сперматозоиды с фрагментацией ДНК могут повреждать яйцеклетку и при протоколе ЭКО. В результате она теряет функциональность, эмбрион не образуется, протокол оплодотворения оканчивается неудачно. Если уровень фрагментации ДНК невысок, то в некоторых случаях молодая и здоровая яйцеклетка может восстановить структуру цепочки.

Причины фрагментации

Механизмы, которые приводят к фрагментации нитей ДНК, до сих пор до конца не исследованы. Одной из наиболее вероятных версий считается окислительный стресс сперматозоидов − повреждение их мембран, белков и ДНК свободными радикалами (активный кислород – ROS, или АФК). Последние являются продуктом обменных процессов в клетках, естественным компонентом среды, в которой вызревают сперматозоиды, и семенной плазмы. В норме радикалы нейтрализуются веществами-антиоксидантами, но в ряде случаев (при воспалительном процессе, иммунных нарушениях) баланс нарушается, активных форм кислорода становится слишком много. Выявить наличие АФК можно при помощи ROS-теста.

Основные причины окислительного стресса, приводящего к фрагментации ДНК:

  • Хронические воспалительные процессы в органах малого таза: яичках, их придатках, простате, мочевом пузыре, даже в копчике (инфекция легко мигрирует с кровотоком, периодически активизируясь).
  • Варикоцеле – расширение вен мошонки, приводящее к застою крови и нарушению питания яичек.
  • Длительное воздержание (чем дольше сперматозоид находится в придатке яичка, тем выше вероятность его повреждения оксидантами).

  • Интоксикация (курение, алкоголь, пестициды, гербициды). Исследования (Mutat Res за 1996 г, № 351(2), стр. 199-203, Cancer Inst за 1997 г, № 89(3), стр. 238-244) выявили прямую зависимость между онкологическими заболеваниями у детей и курением их отцов (сперматозоиды которых подверглись окислительному повреждению ДНК).
  • Длительный прием медикаментов: препараты для лечения гипертонии, подагры, противосудорожные, метадон, некоторые антибиотики.
  • Аутоиммунные нарушения, при которых организм вырабатывает антитела против собственных половых клеток.
  • Злоупотребление кофе (более 300 г в день). Кофеин способен провоцировать повреждения ДНК и препятствовать восстановлению нитей.

У 40% мужчин с бесплодием выявляется повышенный уровень активных форм кислорода (Androl за 2012, №33(6), Fertil. Steril за 1995 № 64(4)), поэтому определение их уровня является важным этапом диагностики.

Диагностика

Оценку фрагментации ДНК спермограмма не дает. С помощью этого анализа невозможно определить качество генетического материала, который несет сперматозоид. Даже расширенная версия с морфологией по Крюгеру позволяет обнаружить лишь внешние патологии головки (сперматозоиды с поврежденной цепью ДНК внешне могут ничем не отличаться от нормальных). Согласно исследованиям (https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1110569016300607)10% мужчин с совершенно нормальной спермограммой не могут иметь детей именно из-за фрагментации ДНК, но им диагностируют идиопатическое (без видимых причин) бесплодие.

Читайте также:  Почему грудной ребенок мало спит как это определить, правила крепкого сна

Тест на ДНК-фрагментацию позволяет парам выявить причину бесплодия и самопроизвольных абортов на ранних сроках. Анализ сперматозоидов на ДНК-фрагментацию перед ЭКО необходим для определения следующих параметров:

  1. Частота оплодотворения яйцеклетки.
  2. Качество предимплантационного развития эмбрионов.
  3. Вероятность развития врожденных пороков плода и выкидышей на ранних сроках.

В зависимости от результатов определяют целесообразность применения того или иного метода ЭКО.

Частота наступления беременности для пациентов с разной степенью фрагментации ДНК

Тест на ДНК-фрагментацию особенно актуален для мужчин, которые решили завести ребенка в позднем возрасте. После 45 лет риск окислительных повреждений сперматозоидов существенно увеличивается. В зоне повышенной опасности мужчины с артериальной гипертензией, сахарным диабетом, ожирением.

Типы тестов и расшифровка результатов

Исследование сперматозоида на наличие повреждений ДНК относится к области геномики и микробиологии. В андрологии и репродуктологии применяют следующие типы тестов:

  • TUNEL. Устаревший метод, который по-прежнему практикует большинство лабораторий. Для выявления пробелов в цепочке ДНК используется светооптический эффект. Отдельные нуклеотиды маркируются и помещаются в образец спермы. Там они находят сперматозоиды с поврежденными сегментами цепочек и встраиваются в них. Половые клетки с вклинившимися в ДНК нуклеотидами будут светиться, лаборантам остается вычислить их процент в общей массе. Результат будет готов через 2 недели (в некоторых лабораториях срок продлевается до трех).
  • HALO (HALOSPERM-тест, SCD). В отличие от предыдущего метода подсвечиваются не битые, а целые ДНК. Сперму смешивают с реактивом, в результате чего вокруг нормальных сперматозоидов образуется хорошо заметный ореол (на фото ниже). Метод считается наиболее чувствительным. Результат будет готов через 1-3 дня.
  • SCSA. Сперматозоиды просвечивают лазерным лучом, под воздействием которого они окрашиваются в зависимости от степени повреждений ДНК: зеленый – норма, желтый – несущественные повреждения, красный – серьезные дефекты. Референсное (среднее для здорового мужчины) значение – 20% (меньше – норма, больше – высокий уровень фрагментации).

Анализ ДНК методом HALO

Тест проводится только совместно со спермограммой. Некоторые лаборатории позволяют предоставить предыдущий результат анализа, выполненного не более двух дней назад. Подготовка к сдаче теста на фрагментацию такая же, как и перед обычной спермограммой.

Цены в популярных медучреждениях (по умолчанию указана стоимость методом TUNEL без учета цены спермограммы):

  • «ДНКом»: 8340 руб.;
  • «Инвитро»: 8620 руб.;
  • «Сперматест»: 6900 руб. за HALO, 7900 руб. за TUNEL.

По завершении исследования формируется протокол, где указывается индекс фрагментации – процентное соотношение между здоровыми и дефектными сперматозоидами (DNA Fragmentation Index (DFI)). Пример заключения и референсные значения:

Заключение теста ДНК-фрагментации, выполненного методом TUNEL

Интерпретация результатов исследования, выполненного методом HALO:

  1. 50%: потребуется отбор и искусственное введение сперматозоида в яйцеклетку (ИКСИ).
  2. > 60%: вероятность успешного протокола ИКСИ крайне низка, рекомендуется донорская сперма.

Для определения причин фрагментации назначают УЗИ органов малого таза, исследования спермы, простатического сока, крови и мочи на наличие инфекций.

Лечение фрагментации ДНК сперматозоидов

Методы лечения зависят от выявленной причины. Если БАК-посев или микроскопическое исследование показали наличие инфекции, то назначают курс антибиотиков. Варикоцеле, нарушение проходимости уретры, крипторхизм лечат путем хирургического вмешательства.

Уровень фрагментации ДНК можно снизить при помощи антиоксидантной терапии (Cochrane Database Syst Rev (сборник баз данных по медицине, «библиотека Кокрейна») 2011 г № 1, CD007411). В центре вспомогательных репродуктивных технологий было выполнено пилотное исследование, в ходе которого было проанализировано 32 неудачных протокола ЭКО + ИКСИ (Источник: «Экспериментальная и клиническая урология», № 3 за 2017 г, стр. 70-76). У мужчин диагностирована низкая фертильность спермы: олигоастенотератозоспермия (малоподвижные сперматозоиды с нарушенным строением) при высоком уровне фрагментации ДНК (более 30%). Средние значения фрагментации и АФК были 38% и 4,6 соответственно.

Пациентам была предложена антиоксидантная терапия, включающая ежедневный прием следующих препаратов:

  • Селен (100 мг);
  • L-карнитин (3000 мг);
  • Витамины группы Е (токоферолы и токотриенолы в количестве 400 МЕ).
  • Витамин С (1000 мг).
Ссылка на основную публикацию
Фосфатидилхолин в лецитине, Phosphatidyl Choline, Source Naturals, 420 мг, 180 капсул — в онлайн мар
Лецитин: фосфолипиды на страже здоровья Если в ваши двери постучалась повышенная утомляемость, раздражительность, плохой сон, если участились головные боли, мир...
Флюорография трактовка заключения, нормы — «Online Диагноз»
Что обозначают в легких плевральные наслоения при флюорографии Флюорография легких – это обследование органов грудной клетки при помощи рентгеновских лучей,...
Флюороз зубов и его формы классификация, причины, симптомы, лечение и профилактика флюороза
Развитие флюороза При анализе специальной зарубежной и отечественной литературы становится известным, что патогенез флюороза зубов до настоящего времени остается не...
Фосфоглив лиофилизат инструкция по применению, аналоги, состав, показания
Фосфоглив ® - инструкция по применению по применению препарата ФОСФОГЛИВ® Оглавление Регистрационный номер Торговое название Химическое название Группировочное название Лекарственная...
Adblock detector